您当前的位置:志发医学论文网 > 医学论文范文 > 公共卫生与预防 > 公共卫生与预防

丙型肝炎病毒感染人群的戊型肝炎流行特征分析

添加时间:2018-04-13 09:48
  摘要:目的 了解丙型肝炎病毒 (HCV) 感染人群中的戊型肝炎病毒 (HEV) 重叠感染流行情况, 为更有效地开展丙型肝炎和戊型肝炎防治工作提供科学依据。方法 采集2015年10月2016年12月孝感地区HCV感染者的血清进行抗-HEV Ig G、抗-HEV IgM筛查。对调查发现的抗-HEV IgM阳性样本进行核酸检测和基因分型。对HCV感染者进行肝功能筛查以及收集其人口学资料进行分析。结果 164例HCV感染者中抗-HEV Ig G阳性率为34.15%, 抗-HEV IgM阳性率为2.44%% (4/164) .抗-HEV Ig G阳性率在性别和年龄上差异均无统计学意义 (P<0.05) , 4个抗-HEV IgM阳性个体中异常指标2个, 异常个体值分别为ALT 328.05 U/L、AST 259.80 U/L、总胆红素 (TBIL) 107.65μmol/L、直接胆红素 (DBIL) 5.32μmol/L和ALT 32.01 U/L、AST 40.20 U/L、总胆红素 (TBIL) 10.65μmol/L、直接胆红素 (DBIL) 9.32μmol/L, 其中1个HEV RNA为阳性, 基因型为Ⅳd亚型。结论 HCV感染者HEV既往感染和急性感染较高。对有HCV感染史的人群进行HEV筛查很有必要, 同时要采用综合治疗。
  
  关键词:戊型肝炎病毒; 丙型肝炎病毒; 血清流行病学; 基因型; 混合感染;
  
  戊型病毒性肝炎 (hepatitis E, HE) 是经粪-口途径传播的急性自限性传染病, 主要临床症状为食欲减退、恶心呕吐、乏力、肝大及肝功异常, 小儿发病率低, 孕妇患戊肝病死率高。现已是世界卫生组织公认为发展中国家重要的公共卫生问题之一[1].HEV的感染呈全球性分布, 每年预估新发病例200万, 在发展中国家, 戊型肝炎属于介水传染病, 除了诱发肝病外, 还可能导致神经障碍[2].HEV感染可能会导致HBV (hepatitis B virus) 、HCV (hepatitis C virus) 、HBV/HCV人群的慢性肝病增强[3-6].目前HEV主要分为4种基因型, 其中HEV-Ⅰ型流行最广, 广泛分布在亚洲和非洲;HEV-Ⅱ型分布比较聚集, 主要集中于墨西哥、尼日利亚、纳米比亚和其他几个西非国家;HEV-Ⅲ型在猪群等动物普遍存在, 但临床上感染此型病毒的病例几乎全部来自发达国家;HEV-Ⅳ型在印度、中国和一些欧洲国家均被发现可在动物间传播。目前我国报道的HEV主要有Ⅰ型和Ⅳ型, 其中HEV-Ⅳ型感染率超过HEV-Ⅰ型[7].陆一涵等发现我国部分地区猪群中有Ⅲ型和Ⅳ型共存的现象[8].我国目前HCV与HEV合并感染的报道较少。综述国外文献后发现, HCV感染人群感染HEV病毒都是HEV-Ⅲ型, 而我国主要流行的是HEV-Ⅰ型和Ⅳ型, 因此有必要加强HCV和HEV混合感染流行特征分析。笔者现对孝感地区HCV感染者进行HEV既往感染、急性期感染、肝功能指标分析和HEV基因型分析, 具体如下。
  
  1 资料与方法
  
  1.1 研究对象
  
  在知情同意情况下, 2015年10月~2016年12月通过安陆市疾病预防控制中心疾控科收集不同医院上报的HCV感染者信息, 告知研究目的, 在保障个人隐私的情况下, 在个人自愿参加这项调查研究的人员中采集抗-HCV阳性者164人的人口统计学数据和采集其血清样本。样本来源于安陆市疾病预防控制中心、安陆市普爱医院、安陆市中医院、安陆市烟店卫生院。采外周静脉血5 ml, 3 000r/min离心5 min, 吸取上层血清分成两管置-80℃保存。
  
  1.2 方法
  
  1.2.1 HEV抗体和转氨酶检测
  
  对164例HCV感染者检测抗-HEV Ig M和抗-HEVIg G (试剂由北京万泰生物药业有限公司提供) .对164份样本进行谷丙转氨酶 (ALT) 、谷草转氨酶 (AST) 、直接胆红素 (DBIL) 和总胆红素 (TBIL) 检测 (试剂由武汉生之源生物科技有限公司提供) .ALT、AST、DBIL和TBIL采用IFCC速率法, ALT/AST≥40 U/L、DBIL≥6.8μmol/L、TBIL≥18μmol/L或<2μmol/L判为异常。具体操作严格按试剂说明书进行, 整个过程严格进行质量控制。
  
  1.2.2 部分HEV ORF2区域序列分离
  
  对抗-HEV Ig M阳性样本用QIAamp Viral RNA Mini kit提取HEV RNA (QIAGEN) , 取备用血清样品140μl按试剂说明书的步骤进行提取, 最后获得30μl的RNA提取液。Primer Script 1st strand c DNA synthesis kit (TAKARA) , 取5μl RNA按照试剂说明书的步骤进行反转录。用巢氏RT-PCR反转录产物进行HEV ORF2区域部分序列扩增, PCR引物和程序设置按照参考文献提供的方法操作[9-10].整个实验重复两次, 阳性结果, 割胶纯化后进行克隆测序 (上海生物工程有限公司) .
  
  1.2.3 序列分析
  
  参照序列为HEVⅠ型代表序列:L08816 (Ⅰa) 、AY230202 (Ⅰb) 、AY204877 (Ⅰc) ;Ⅱ型代表序列:M74506;Ⅲ型代表序列:AF060668 (Ⅲa) 、AB189073 (Ⅲb) 、AB073912 (Ⅲc) ;IV型代表序列:ABl97674 (Ⅳa) 、AF103940 (Ⅳb) 、AB161719 (Ⅳc) 、AB161717 (Ⅳc) 、AJ272108 (Ⅳd) 、FJ461765 (Ⅳd) 、AY723745 (Ⅳe) 、AB0825558 (Ⅳf) 、AB220974 (Ⅳf) 、AB108537 (Ⅳg) 、GU188851 (Ⅳh) 、KU974934 (Ⅳh) 、KU974936 (Ⅳh) 、JQ993308 (Ⅳi) 、DQ450072 (Ⅳi) .
  
  1.3 统计学处理
  
  采用Excel 2007进行数据录入, 使用SPSS 17.0软件的率的χ检验对结果进行统计分析。使用Mega 5.0软件对不同HEV ORF2部分序列进行比对, 分析核苷酸序列的同源性, 并选择合适模型法构建系统进化树。
  
  2 结果
  
  2.1 一般情况
  
  164例HCV者平均年龄 (53.03±12.25) 岁, 其中抗-HEV Ig G阳性率为34.15% (56/164) , 抗-HEV Ig M阳性率为2.44% (4/164) .男性抗-HEV Ig G阳性率为32.0% (24/75) , 女性抗-HEV Ig G阳性率为35.96% (32/89) , 差异无统计学意义 (χ=0.283, P=0.595) .
  
  2.2 抗HEV-Ig G在HCV感染者中的年龄分布
  
  HCV感染者抗-HEV Ig G阳性率在年龄上分布差异无统计学意义 (χ=0.927, P=0.921) (见表1) .
  
  2.3 ORF2核苷酸部分序列同源性分析和构建基因进化树
  
  采取巢式RT-PCR检测4份抗HEV-Ig M阳性血清标本, HEV RNA总检出率为25.00% (1/4) .将分离的HEV病毒株ORF2 304 bp核苷酸序列与参考病毒株序列进行比对并绘制系统进化树, 分析显示, HEV病毒株基因型属于Ⅳd亚型, 与2008年湖北省人源HEVⅣd (FJ461765) 序列同源性为97.37%.系统进化树见图1.
  
  2.4 抗-HEV Ig M阳性个体肝功能指标
  
  4个抗-HEV Ig M阳性个体肝功能指标2个正常, 2个异常, 分别是ALT 328.05 U/L (正常参考值0~40 U/L) 、AST 259.80 U/L (正常参考值0~40 U/L) 、TBIL107.65μmol/L (正常参考值3.42~20.5μmol/L) 、DBIL 5.32μmol/L (正常参考值0~6.8μmol/L) 和ALT 32.01 U/L (正常参考值0~40 U/L) 、AST 40.20U/L (正常参考值0~40 U/L) 、TBIL 10.65 U/L (正常参考值3.42~20.5μmol/L) 、DBIL 9.32 U/L (正常参考值0~6.8μmol/L) .
  
  3 讨论
  
  本调查研究首次开展HCV感染者的HEV流行调查, 其HEV既往感染和急性感染较高, 因此要开展HCV感染者的HEV筛查。本次HCV感染者没有进行慢性HEV感染调查, 先前国外有关报道HCV和HBV混合感染会导致肝炎病情加重[3-6], 因此应该增加样本量对HCV感染者抗-HEV Ig M病人进行追踪调查, 以进一步研究我国HCV与HEV混合感染的慢性转化情况。本次调查性别之间HEV既往感染差异无统计学意义。不同年龄组之间既往感染差异也无统计学意义, 跟以往独自HEV既往感染随年龄增长不一致[11-12], 可能是由于样本量不够多, 后续需增加样本量验证。
  
  本研究仅仅成功分离出1条304 bp HEV ORF2序列, 经同源性比较和系统进化树分析, 分离出的1条序列属于Ⅳd亚型。与2008年湖北省人源HEVⅣd (FJ461765) 序列同源性为97.37%.Ⅳd亚型是否在此区域流行和导致混合感染后慢性转化还要增加HEV RNA阳性样本量予以验证。与先前山东省公开的猪源HEVⅣd (基因编号:KF176370) 的同源性为97.04%, 暗示可能存在猪源HEV传给人类, 且2015年对孝感地区商品猪的HEV急性感染调查结果显示普遍存在HEV急性感染[13].中国主要存在HEVⅠ和Ⅳ型。1986年我国新疆暴发流行了HEVⅠ型导致119 280人发病, 707人死亡[14].近年来中国HEVⅣ感染超过HEVⅠ, 目前中国流行主要是HEVⅣ[15].因此, 要加强对HEVⅣ在国内流行趋势和特征监测。4个抗-HEV Ig M阳性个体肝功能指标2个正常, 2个异常, 表明存在亚临床症状, 但有临床症状的比率较高, 可能跟采集抗-HEV Ig M阳性样本量较少有关, 后期需增加此类样本量加以验证。混合感染是否会导致临床症状加重需要进行后期追踪研究。
  
  戊肝是一种人兽共患病, 张守德等报道安陆市是湖北省生猪养殖比较集中的地区, 对周边地区输出量较大, 而且血清学调查发现猪HEV阳性率显着高于普通人群[16-17].因此, 安陆市HCV感染者应进一步避免接触生猪这一传染源。我国已经生产和批准了全球第一个预防戊肝的疫苗, 对易感和重点人群接种疫苗是预防戊肝的重要措施;同时采取切断传播途径为主的综合性预防措施来控制戊肝的流行。有关报道HEV的不同基因型热耐受性不一致[18].因此, 加强HEV分型后, 应根据不同基因型热耐受性不同有针对地开展HEV消杀工作。
  
  参考文献
  
  [1]AGGARWAL R, NAIK S.Epidemiology of hepatitis E:current status[J].J Gastroenterol Hepatol, 2009, 24 (9) :1484-1493.
  [2]BLASCO-PERRIN H, ABRAVANEL F, BLASCO-BAQUE V, et al.Hepatitis E, the neglected one[J].Liver Int, 2016, 36 (S1) :130-134.
  [3]CHENG SH, MAI L, ZHU FQ, et al.Influence of chronic HBV infection on superimposed acute hepatitis E[J].World Journal of Gastroenterology, 2013, 19 (35) :5904-5909.
  [4]徐鸿绪, 周淑红, 黄健宇, 等。戊型肝炎病毒与HBV重叠感染患者的血清学分析[J].中国微生态学杂志, 2011, 23 (6) :536-537, 542.
  [5]KUMAR M, SHARMA BC, SARIN SK.Hepatitis E virus as an etiology of acute exacerbation of previously unrecognized asymptomatic patients with hepatitis B virus-related chronic liver disease[J].J Gastroenterol Hepatol, 2008, 23 (6) :883-887.
  [6]YONG MK, PAIGE EK, ANDERSON D, et al.Hepatitis E in Australian HIV-infected patients:an under-recognised pathogen[J].Sex Health, 2014, 11 (4) :375-378.
  [7]WHO.Hepatitis E vaccine:WHO position paper, May 2015[J].Wkly Epidemiol Rec, 2015, 90 (18) :185-200.
  [8]陆一涵, 郑英杰, 朱建福, 等。中国发现基因3型戊型肝炎病毒[J].中华疾病控制杂志, 2007, 11 (1) :5-10.
  [9]赵晨燕, 刘小桂, 樊金萍, 等。湖北地区人源与猪源戊型肝炎病毒部分基因序列的分析[J].中国病毒病杂志, 2013, 3 (1) :27-31.  
  [10]胡玲玲, 王跃荣。衣壳蛋白和甲基转移酶对戊型肝炎病毒的基因分型[J].检验医学与临床, 2015, 12 (11) :1545-1546.
  [11]何义林, 张翔, 移钱华, 等。戊型病毒性肝炎危险因素病例对照研究[J].中国公共卫生, 2009, 25 (12) :1449-1451.
  [12]张守德, 疏义林, 万琴, 等。2014年-2015年安陆市从业人员抗戊型肝炎Ig M抗体分析[J].中国卫生检验杂志, 2016, 26 (16) :2407-2409.  
  [13]张守德, 疏义林, 万琴, 等。湖北省孝感地区商品猪的HEV急性感染情况的调查[J].中国热带医学, 2016, 16 (9) :945-946.  
  [14]ZHUANG H, CAO XY, LIU CB, et al.Epidemiology of hepatitis E in China[J].Gastroenterol Jpn, 1991, 26 (3) :135-138.  
  [15]WANG L, LIU L, WEI Y, et al.Clinical and virological profiling of sporadic hepatitis E virus infection in China[J].J Infect, 2016, 73 (3) :271-279.
  [16]张守德, 疏义林, 万琴, 等。湖北省孝感地区商品猪的HEV急性感染情况的调查[J].中国热带医学, 2016, 16 (9) :945-946.  
  [17]张守德, 疏义林, 彭婧, 等。湖北省安陆市猪戊型肝炎血清流行病学研究[J].实用预防医学, 2017, 24 (1) :88-89.
  [18]HUANG F, LI Y, YU W, et al.Excretion of infectious hepatitis E virus into milk in cows imposes high risks of zoonosis[J].Hepatology, 2016, 64 (2) :350.
志发医学论文网(www.zhifayixue.com)始建于2014年,是一家专业提供代写医学论文服务的网站!
本站部分论文收集于网络,如有不慎侵犯您的权益,请您及时致电或写信告知,我们将第一时间处理
网站备案号:赣ICP备13000431号